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CO2培養箱買家指南

CO2培養箱或加氣培養箱是哺乳動物細胞培養實驗室中的固定裝置。雖然培養箱技術近幾十年來沒有太大變化,但決定正確的選擇每年可以節省數百小時。

購買CO時的注意事項2培養箱包括:

  • 尺寸 - 您的實驗需要多少空間?您需要在主孵化室內擠出多少設備,以及需要同時運行多少實驗或培養?
  • 大氣控制 - 你有多少,以及哪些氣體?
  • 有可能在培養箱內部工作,門洞**小
  • 濕度及其翻轉側,蒸發
  • 加熱
  • 減少污染風險
  • 去污協議
  • 開門后參數恢復
  • 溫度和環境均勻性
  • 監控和數據捕獲功能,尤其適用于受監管流程
  • 熟悉流程或操作員

 培養箱使用CO 2來控制培養基中的pH并維持對細胞生長**佳的氣氛。室內的典型條件是溫度為37℃,相對濕度為95%,CO 2濃度為約5%。微生物培養箱,本文將不再詳細討論,具有更寬的溫度范圍(通常在5ºC和70ºC之間)。

由于在異G哺乳動物細胞培養物的興趣,基于細胞的測定,和細胞治療的浪涌,二氧化碳培養箱是一個增長的業務。

由于在異G哺乳動物細胞培養物的興趣,基于細胞的測定,和細胞治療的浪涌,二氧化碳培養箱是一個增長的業務。商業智能公司Research and Markets估計 ,未來四年對二氧化碳培養箱的需求將以每年近8%的速度增長。考慮到購買價格(從大約3,000美元到南方的20,000美元),平均使用壽命大約為10年,實驗室資產的預計增長率很強勁。

 “我們的客戶越來越多地與脆弱的細胞類型,比如干細胞和原代細胞的工作,”莫莉愛,對CO全球**產品經理說:2的賽默飛世爾科技培養箱。Thermo Fisher**近推出了一種新產品Cell Locker System,它將培養箱的較大工作室隔離到可移動的保護區域,以提高培養效率和敏感培養的安全性。“細胞培養者現在能夠在一個培養箱中隔離細胞類型或不同的項目,在不受干擾的環境中節省空間和氣體,同時防止包括支原體在內的循環交叉污染。”

 雖然有些實驗室對培養箱的尺寸和特征有所顧忌,但更大更復雜并不總是更好。需求有時需要一個小型的,個人大小的培養箱,用戶可以將其放入實驗室的一個角落,忘記何時不使用它。對于這些用戶來說,來自Labnet 的18磅重的可移動  迷你微生物學和血液學培養箱可能是一個不錯的選擇。Labnet還提供了更大的  211DS型號,帶有內部電源插座,可堆疊擱架,大型觀察面板和SmartChek™溫度控制系統。

 Binder還攜帶一系列緊湊型培養箱,其型號為C 170,可堆疊并使用180°C空氣對設備進行滅菌。

重要的功能

“在我們建立**個培養箱之前,我們向微生物學家詢問了他們**關心的問題,他們回答了'干燥'和'污染',”NuaireG際銷售副總裁Buckner Richerson說。

 Nuaire通過明智地應用HEPA過濾降低其培養箱(和生物安全柜)的污染風險,以保持培養箱內部符合ISO 5級清潔標準。主膠囊通過過濾和調節,輕柔地連續擦洗腔室氣氛; 過濾器,泵和溫度傳感器都位于工作區域之外。

 “這種設計每20分鐘更換一次培養箱的氣氛,同時**大限度地減少蒸發,并在關門后20分鐘內將裝置恢復到**佳運行狀態,”Richerson補充道。根據Richerson的說法,Nuaire每年銷售大約2,000個培養箱,幾年來沒有聽說過污染事件。“當客戶確實遇到污染時,我們是**個聽到污染的人。”

 作為一般污染緩解和蒸發**小化策略,Richerson建議緩慢換氣,盡可能使氣流垂直層流。水平流動的空氣產生風洞效應,通過在樣品周圍產生氣流渦流來促進污染和蒸發。

 為了消除進入和未過濾的病原體,除了**基本的模型外,Nuaire在其所有直接熱培養箱中都使用加熱滅菌。去污在145ºC長時間發生,通常是一夜之間。Nuaire還提供銅襯里內飾作為選項,Richerson說一些用戶更喜歡作為避免污染的額外步驟,但通常不是必需的。

NU-5710直熱式培養箱Richerson還指出,一些熱滅菌協議非常復雜,用戶**終會停止使用它們。循環可能需要人為干預,移除內部結構(例如擱架)或用虛設單元替換溫度傳感器。“培養箱內的所有東西都能在145攝氏度的溫度下存活,所以你永遠不需要拿出任何東西。培養箱基本上變成了高壓滅菌器。“

 所有培養箱都可以進行手動清潔,但在Nuaire培養箱中,所有內部角都是圓形的,這樣可以減少微生物可以抓住的區域,并便于使用化學藥劑進行清潔。

NU-5710直熱式培養箱。圖片由NuAire提供。

 

加熱和消毒

 水套是培養箱加熱的一種老策略。這些裝置仍然可用,特別是在二手市場中,但是水套已經讓位于空氣護套,直接加熱或兩種技術的組合。

培養箱制造商在這三種加熱方案中引入了自己的改進。例如,來自Eppendorf 的Galaxy®170S直熱式CO2培養箱就是一個帶有專有扭轉的直接加熱裝置的例子 - 一種六面,無風扇,無過濾器的加熱系統,根據該公司的說法,它可以防止變寬溫度和二氧化碳的波動,這是壓力細胞。

“客戶喜歡水套式培養箱的溫度安全性,但由于需要水夾套模型進行持續維護以及泄漏風險,因此已經開始直接加熱模型,”Caron營銷副總裁Alan Campbell說道。產品與服務。后在2017年引入的卡隆CO其Wally®線2培養箱,其中,根據坎貝爾,提供的水夾套和直接熱設計的優點,“與自己無關的缺點。”卡隆使用包圍所述相變材料文化空間而不是水。

 Wally還采用纖薄的外形設計,允許將設備放置在較小的實驗室,走廊,過道和其他密封區域,其中培養箱門打開可能會導致問題。“與傳統的立方體培養箱相比,Wally可以節省高達19英寸的深度,”Campbell解釋道。

 空間利用延伸到培養箱本身。大多數實驗室工作人員只使用培養箱的前部區域,因為背部很難到達。“他們支付的容量高達一半是浪費的空間。Wally纖細的腔室深度使得所有腔室容積都可以使用,同時為**常用的細胞培養瓶/板尺寸提供足夠的空間。

 Caron還對滅菌周期進行了升級,在標準培養箱中,滅菌周期非常耗時(基于熱量)或勞動密集型(濕H 2 O 2)。Wally使用(另一項正在申請**的)干H 2 O 2循環,Campbell說在短短兩小時內提供可驗證的12-log滅菌,“沒有耗時的腔室配置和濕H 2 O 2過程所需的清理“。

 過氧化物滅菌裝置通常作為第三方升級添加到培養箱中。松下生產的H 2 O 2滅菌套件通過經銷商銷售,例如VWR,該公司聲稱其  比熱滅菌快8倍。它還銷售全系列的培養箱,尺寸從幾立方英尺到30立方英尺不等,具有標準和可選功能,如加熱滅菌,紅外二氧化碳和氧氣傳感器,溫和氣流,微處理器控制,圖形監控和數據收集。

 鑒于“典型”培養箱的多樣化應用和操作參數范圍,存在的消毒替代品并不令人驚訝。Analytic Jena提供一種培養箱型號UVP,它采用紫外線消毒代替熱,化學清洗或過氧化物。

無風扇,無微生物

 據里克·埃里森在美GBMT業務發展經理,影響CO**的問題2培養箱交叉污染,振動,恢復慢和門開口后讀數,以及對于微生物污染創造了機會的大門和墻壁上凝結。

CO2 Cell 190舒適培養箱,200C滅菌BMT在其CO2培養箱中采用無風扇設計,顯著降低了前兩個問題的影響。“零振動實際上消除了細胞邊緣效應的任何可能性,”埃里森說。“無風扇設計還可以減少蒸發,從而**大限度地減少樣品中的水分流失。”

 無風扇培養箱還增加了可用空間,因為不需要管道或內置HEPA組件。“維護和更換這些組件被消除,因為是更換風扇HEPA過濾器元件的成本。”湍流氣流是潛在的污染的CO的主要來源2培養箱。“我們的培養箱專門設計用于提供**低的污染風險,”Ellison補充道。

CO2 Cell 190舒適培養箱,200C滅菌。圖片由BMT提供。

 污染從實驗室內的任何來源進入培養箱,包括個人的頭發和衣服,打開的窗戶,甚**實驗室的通風系統。一旦進入培養箱,微生物就會閂到風扇上,在那里它們遍布整個裝置。

 “粉絲仍然是培養箱中清潔的**困難的組成部分,”埃里森說。“因此,帶風扇的培養箱需要在風扇前添加昂貴的HEPA過濾器以保護風扇。這增加了風險和成本的另一個方面。“

 這并不是說所有空中運動都會傷害文化。例如,Amerex在其INCUMAX™培養箱中使用強制空氣循環,  以提供開門后溫度均勻性和快速恢復。應該可以在達到平衡之前獲得強勁的氣流,然后在維護模式下保持更不穩定的氣流,但市場上沒有培養箱似乎具有此功能。

 但是當空氣傳播的生物進入培養箱時,冷凝成為它們的生長介質。BMT通過將孵育室包裹在直熱電纜中,使所有表面迅速達到指定溫度,從而**大限度地降低了這種風險。三回路直接加熱設計允許編程四個關鍵加熱區:腔室底部,腔室門,腔室壁和腔室頂部。BMT對它們進行編程,以略微不同的速率加熱,以產生柔和,溫和的對流。

 “**重要的是,對于冷凝控制,會產生一個冷點(相對于其他加熱區域),以便將水分吸到室底和水盤中,”Ellison補充道。“玻璃門由外部隔熱門加熱,以阻止冷凝形成,從而消除了細菌生長的環境,使得水套室不能。