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培養箱架構:為您的細胞構建舒適的家

二氧化碳培養箱一直是組織培養實驗室的支柱,比大多數研究人員的專業壽命更長。這些可靠的工作委托不僅包括大多數基于細胞的實驗的常規初始起始材料,而且通常是非常寶貴的實驗樣品,使科學家能夠發現研究中令人興奮的新細胞突破。在這里,我們將討論為實驗室選擇新培養箱時要考慮的一些關鍵特性。

干或濕溶液?

傳統的二氧化碳培養箱是一個盒子被裝滿水的城墻包圍,這種技術仍然占大多數當今實驗室中孵化。

“從歷史上看,人們獲得水夾套培養箱的原因之一是溫度均勻性從一側到另一側,從上到下,非常好,”賽默飛世爾科技**全球細胞培養**Mary Kay Bates說。水的**熱質量使培養箱能夠比干燥的培養箱保持其溫度更長,也許更均勻,對于任何容易停電的實驗室而言,它還有助于抑制任何振動。

但采取傳統方法可能有其缺點。厚壁增加了培養箱的足跡,可以擠壓其內部尺寸。水套式培養箱可能需要一整天才能達到穩定的工作溫度。它們很重,需要在移動之前排干。他們需要維護。有些可能會泄漏。奧克蘭研究院兒童醫院的科學家David Killilea說,如果你在水套內受到污染,他們“真的很痛苦” 。Killilea創建并管理了一個學術核心設施。

 干式夾套培養箱已經存在了一段時間,但它們“不那么穩定,并且存在一些加熱不規則 - 培養箱的溫暖部分和較冷的部分,”Killilea回憶道。他說這些問題已于2001年左右制定出來,當時他購買了四臺三洋培養箱,這些培養箱使用空氣夾套和直接加熱來包裹腔室。他說,他向許多同事推薦了這個培養箱,并且**近還購買了另外兩個(現在的松下品牌)更新型號。

大多數培養箱出售今天采用直接加熱和/或空氣夾克技術麗貝卡·高利諾,產品經理,CO說,2培養箱,在微量離心北美。許多,如果不是大多數,主要的CO2培養箱供應商制造的干套模型,有的(如Eppendorf)中甚**不再提供水套的版本。

保持衛生

 對于許多用戶來說,避免污染的傳播可能是培養箱的**高優先級(而且供應商熱衷于宣傳這一點作為創新點)。華盛頓大學轉基因資源項目的項目經理羅伯特·亨特 **近為他的核心購買了一對堆疊的Thermo Scientific Heracell培養箱。因為核心經常從外部來源進入細胞,他說,“我真的對銅襯里培養箱感興趣,只是為了控制真菌和孢子以及這些類型的東西 - 以及高溫去污系統。”

 銅內飾并非都是平等的。有些像Heracell一樣是100%純銅。其他產品,如Thermo Scientific的Forma系列,配備不銹鋼內飾,可選擇銅架和組件。像松下這樣的其他公司提供注入銅的不銹鋼--Killilea說,它解決了銅銹(變色)和純銅銅粉的問題。瓜里諾指出,美G環境保護署已經制定了表面**低銅百分比的標準,以使其具有抗菌功效。

高熱去污是使整個腔室達到并保持特定溫度一段給定時間的過程。

 此選項僅適用于干式夾套(非水夾套)培養箱。該方法可以使用通常不超過95℃的濕熱,或干熱,其可以高達200℃。在某些型號中,必須在開始凈化循環之前去除某些可能被熱損壞的組件。

 Killilea的新培養箱配備了快速,低溫的過氧化氫蒸汽凈化系統。內置的紫外線燈隱藏在管道系統后面,因此它不會直接影響電池 - 然后導致蒸汽分解成水和氧氣。紫外線燈還可以凈化全天循環的空氣。

 其他設計特征也可以在限制污染方面發揮作用。例如,具有圓角的無縫內部可以限制微生物可以收集的區域,并且HEPA過濾器防止來自常規氣流的污染。當培養箱門打開時,正壓可以幫助防止未經過濾的實驗室空氣進入腔室。

 常識和良好的無菌技術仍然是重要的做法。加州大學伯克利分校的設施監督員之一Alison Killilea表示,她的核心主要使用四個非常古老的Heraeus培養箱:“我認為它們是在80年代或90年代初購買的。”她評論說培養箱沒有水鍋。“你實際上將水直接倒入培養箱中,因為整個過程都是銅襯里的。”雖然沒有去污循環,但實驗室經歷的污染很少。“我們只專注于擁有非常好的技術,所以我們不必使用其中一些備用東西,”她說。

它在空中

能夠在整個室內保持均勻的溫度,高濕度以**小化蒸發,以及一致的CO 2水平以使培養基保持適當的pH,這是CO2培養箱的標志。

然而,試圖證明不同干式夾克技術在實現這些目標方面的差異和好處可能就像玩他/她說的那樣。

 盡管線條有些模糊,但直接加熱系統使用與腔室接觸的加熱電纜,通常被某種類型的jue緣體包圍,以保持溫度。空氣夾套系統加熱腔室周圍的空氣。一些制造商提供混合系統,并且**少有一家制造商(Caron)用保溫凝膠圍繞其腔室。

 BMT的直接加熱系統有三個獨立的加熱回路 - 一個用于門,一個用于側面,一個用于腔室底部。“它們的加熱速度略有不同,因此我們能夠創造自然對流,”該公司科學事業部業務部經理Rick Ellison解釋道。“不僅直接加熱設計允許我們移除風扇,而且[它]允許我們將冷凝物吸入其所屬的腔室底部,”通過創建冷卻點 - 同時保持腔室的每個位置都在設定點為0.1°C**0.25°C。

與此同時,Bates頌揚“循環風扇的優點,即在整個腔室內形成均勻的環境,并確保所有條件(CO 2,溫度和濕度)的快速恢復。在我們的Thermo ScientificTM Heracell™VIOS CO2培養箱中,我們**的Thermo Scientific TM THRIVE TM主動氣流設計可在10分鐘或更短的時間內從標準的30秒開門處恢復。“

 在大多數單元中,從腔室底部的盤中蒸發的水使腔室保持濕潤。對于濕度控制**關重要的應用,一些培養箱監測濕度并用來自外部水庫的蒸汽補充它。貝茨說,后者通常在GMP生產環境中更受歡迎。

缺氧

 隨著人們從培養耐寒細胞系轉向培養原代細胞,干細胞甚**3D培養物,能夠控制O 2水平以及更好地模擬體內環境中的缺氧變得越來越重要。許多廠商現在提供CO 2,其中低氧環境中通過引入氮氣創建孵化。例如,Eppendorf提供兩種選擇:0.1%**19%,或1%**19%,O 2控制。

 還有培養箱可以產生高氧條件。“他們不太受歡迎 - 更多的利基應用,”貝茨說。“有時人們會用它來研究視網膜細胞或肺部疾病,或者[觀察]反應性O 2物種。”

 Xcell Biosciences的小型(3.7升)Avatar系統進一步實現了大氣控制:“我們能夠模擬從循環到骨髓到大腦內發現的液體的各種壓力條件,”**科學官James Lim說。

此外......

 不是所有的設備可以處理高的CO 2和濕度。一些制造商特別推薦用于培養箱的制造商,其中一些在腔室外部具有控制裝置。的Eppendorf提供臺式CO2培養箱內置振動篩。(也有在市場上搖動器具有內置的CO 2控制時,實現“從相反的方向類似的**終結果”,筆記利諾。)類似地,龍沙公司CytoSMART™  和Essen的生物科學的IncuCyte®  實時成像系統被設計成被容納在培養箱中。

 這些天來,這是不難發現的CO 2孵化各種尺寸的觸摸屏控制,數據記錄和以太網連接,外的參數報警,可逆門鉸鏈,多個室內玻璃門(特別是為O 2個 -controlled單位) ,密碼保護的參數和門鎖,甚**冷卻和加熱腔室的能力。無論滿足您實驗室的需求,它都可能在那里。記住要始終練習良好的無菌程序,并且沒有任何替代常識。